La differenza chiave tra l'immunofluorescenza diretta e quella indiretta è che l'immunofluorescenza diretta utilizza un singolo anticorpo che funziona contro il bersaglio di interesse mentre l'immunofluorescenza indiretta utilizza due anticorpi per etichettare il bersaglio di interesse.
L'immunofluorescenza o imaging cellulare è una tecnica utilizzata per etichettare uno specifico antigene bersaglio con un fluoroforo. Qui, il fluoroforo è un composto chimico fluorescente che può riemettere luce su eccitazione della luce. Quando un fluoroforo si lega con l'antigene target, consente la rilevazione della molecola target nel campione. Per descriverlo ulteriormente, quando un antigene si lega con un anticorpo specifico, può essere coniugato con fluorofori. Pertanto, è facile rilevare la presenza dell'antigene bersaglio nel campione durante l'osservazione al microscopio a fluorescenza.
Inoltre, ci sono due tipi di immunofluorescenza; immunofluorescenza diretta e indiretta. La differenza tra immunofluorescenza diretta e indiretta risiede principalmente nel numero di anticorpi utilizzati e nella coniugazione del fluoroforo. Cioè, nell'immunofluorescenza diretta, il fluoroforo si coniuga direttamente all'anticorpo primario mentre nell'immunofluorescenza indiretta, il fluoroforo si coniuga con l'anticorpo secondario.
