Differenza chiave: nitrocellulosa vs membrana di nylon
Il blotting è una tecnica importante per la rilevazione di sequenze specifiche di DNA, RNA e proteine dalle loro miscele in biologia molecolare. Viene eseguito utilizzando una membrana chiamata blot. Esistono diverse tecniche di assorbimento come il blot settentrionale, meridionale e occidentale. La selezione di una membrana adeguata per il processo di blotting deve essere eseguita con attenzione per evitare legami aspecifici e rilevamenti errati. Nitrocellulosa, nylon e PVDF sono membrane comunemente utilizzate nelle tecniche di blotting. Hanno caratteristiche diverse. Il differenza fondamentale tra nitrocellulosa e membrana di nylon è quello le membrane di nitrocellulosa hanno un alto potenziale di immobilizzazione delle proteine mentre le membrane di nylon hanno un alto potenziale di immobilizzazione degli acidi nucleici. Tuttavia, entrambi i tipi di membrane sono spesso usati nelle tecniche di blotting.
INDICE
1. Panoramica e differenza chiave
2. Che cos'è una membrana di nitrocellulosa
3. Che cos'è una membrana di nylon
4. Confronto fianco a fianco -Nitrocellulosa vs membrana di nylon
5. Riepilogo
Cos'è una membrana di nitrocellulosa?
La membrana di nitrocellulosa è una membrana filtrante comunemente usata nelle tecniche di assorbimento di acidi nucleici e proteine. Ha un alto potenziale di legame con le proteine. Quindi, le membrane di nitrocellulosa sono ampiamente utilizzate nella tecnica del western blotting. Le membrane di nitrocellulosa sono compatibili con tutte le tecniche di ibridazione e mostrano capacità di legame superiori senza interferenze. Le membrane di nitrocellulosa sono di natura idrofila per natura. Fanno interazione idrofila con le molecole e le immobilizzano in modo efficiente sulla membrana. Le membrane in nitrocellulosa commerciali sono disponibili in due dimensioni dei pori: 0,45 e 0,2 µm.
Figura 01: membrana di nitrocellulosa utilizzata nel western blotting
Cos'è una membrana in nylon?
La membrana di nylon è un altro tipo di membrana commerciale utilizzata nelle tecniche di blotting. Viene utilizzato in alternativa con membrane di nitrocellulosa per il blotting del sud e del nord. Le membrane in nylon sono ideali per il Southern blotting rispetto alla nitrocellulosa a causa della loro elevata affinità al legame con il DNA. A causa delle numerose caratteristiche uniche delle membrane di nylon, i ricercatori usano comunemente membrane di nylon per il blotting del sud e del nord anziché per le membrane di nitrocellulosa. Le membrane in nylon sono consigliate anche per lo stripping e il reprobing, a differenza della nitrocellulosa.
Figura 02: membrana di nylon utilizzata per il Southern blotting
Qual è la differenza tra nitrocellulosa e membrana di nylon?
Articolo diff. Al centro prima della tabella
Nitrocellulosa vs membrana di nylon |
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| Le membrane di nitrocellulosa sono fragili. | Le membrane in nylon sono meno fragili. |
| Manipolazione | |
| Sono difficili da gestire. | Sono facili da maneggiare. |
| Reprobing | |
| Le membrane di nitrocellulosa non supportate sono difficili da riapparire. | Il reprobing è facile con le membrane di nylon. |
| Compatibilità con varie condizioni di conservazione | |
| Le membrane di nitrocellulosa hanno meno resistenza per resistere a varie condizioni di conservazione. | Le membrane in nylon rispondono in modo più robusto a varie condizioni di stoccaggio. |
| Uso | |
| È necessaria la pre-bagnatura. | La pre-bagnatura non è richiesta per le membrane in nylon. |
| Natura idrofila | |
| Le membrane di nitrocellulosa sono di natura idrofila ma sono meno idrofile delle membrane di nylon. | Sono di natura altamente idrofila. |
| Potenziale di immobilizzazione | |
| Le membrane di nitrocellulosa hanno meno affinità per gli acidi nucleici. Ma ha un'alta affinità per le proteine. | Le membrane di nylon hanno un alto potenziale di legame con gli acidi nucleici rispetto alle membrane di nitrocellulosa. |
Riepilogo: nitrocellulosa vs membrana di nylon
Le membrane di nitrocellulosa e nylon sono fogli speciali utilizzati nella tecnica di blotting per riprodurre il motivo a bande sul gel. Consentono la possibilità di rilevare una sequenza specifica o una proteina dalle miscele immobilizzandole sulla membrana. Una volta che le molecole si sono immobilizzate sulla membrana, possono essere utilizzate come substrato per l'analisi di ibridazione con sonde etichettate. La membrana di nitrocellulosa è comunemente utilizzata per il rilevamento delle proteine nella tecnica del western blotting grazie alla sua elevata affinità di legame con le proteine. Le membrane di nylon sono spesso utilizzate per il blotting del sud e del nord. Questa è la differenza tra nitrocellulosa e membrana di nylon.
