Elettroforesi vs elettroosmosi
I metodi di separazione fisica come il filtraggio, la distillazione, la cromatografia su colonna non sono metodi facili quando si tratta di separazione di alcune molecole. L'elettroforesi e l'elettroosmosi sono altre due tecniche di separazione che possono essere utilizzate per separare le particelle cariche.
Cos'è l'elettroforesi?
L'elettroforesi è una tecnica per separare le molecole in base alle loro dimensioni. Fondamentale per questa separazione è la carica della molecola e la loro capacità di muoversi in un campo elettrico. Questa è la tecnica più comune e principale in biologia molecolare per separare le molecole, in particolare il DNA e le proteine. Questo è principalmente in uso perché è relativamente facile e poco costoso. L'apparato per l'elettroforesi può essere un po 'complicato e la sua preparazione richiede del tempo. Ma possiamo facilmente realizzare un apparato per l'elettroforesi dalle cose che abbiamo in laboratorio. Le tecniche di elettroforesi possono variare a seconda dei nostri scopi. Possiamo usare l'elettroforesi unidimensionale per la separazione del DNA o delle proteine. L'elettroforesi bidimensionale viene utilizzata quando sono richiesti campioni più risolti (come nel caso dell'impronta digitale). Un gel viene utilizzato come mezzo di supporto per separare le molecole. Questo gel può essere preparato come fogli piani o in tubi. La base di questa procedura è separare le molecole a seconda della loro velocità di movimento attraverso un gel quando viene fornito un campo elettrico. Le molecole caricate negativamente come il DNA tendono a viaggiare verso il polo positivo in questo campo elettrico mentre le molecole caricate positivamente tendono a viaggiare verso il polo negativo. Due tipi di gel sono usati in elettroforesi come agarosio e poliacrilammide. Questi due hanno poteri risolutivi diversi. Il gel funge da setaccio per filtrare le diverse dimensioni delle molecole. Le cariche elettrostatiche che si formano nel gel agiscono come forza. La base di questa procedura è separare le molecole a seconda della loro velocità di movimento attraverso un gel quando viene fornito un campo elettrico. Le molecole caricate negativamente come il DNA tendono a viaggiare verso il polo positivo in questo campo elettrico mentre le molecole caricate positivamente tendono a viaggiare verso il polo negativo. Due tipi di gel vengono utilizzati in elettroforesi come agarosio e poliacrilammide. Questi due hanno poteri risolutivi diversi. Il gel funge da setaccio per filtrare le diverse dimensioni delle molecole. Le cariche elettrostatiche create nel gel agiscono come forza. La base di questa procedura è separare le molecole a seconda della loro velocità di movimento attraverso un gel quando viene fornito un campo elettrico. Le molecole caricate negativamente come il DNA tendono a viaggiare verso il polo positivo in questo campo elettrico mentre le molecole caricate positivamente tendono a viaggiare verso il polo negativo. Due tipi di gel vengono utilizzati in elettroforesi come agarosio e poliacrilammide. Questi due hanno poteri risolutivi diversi. Il gel funge da setaccio per filtrare le diverse dimensioni delle molecole. Le cariche elettrostatiche create nel gel agiscono come forza. Questi due hanno poteri risolutivi diversi. Il gel funge da setaccio per filtrare le diverse dimensioni delle molecole. Le cariche elettrostatiche che si formano nel gel agiscono come forza. Questi due hanno poteri risolutivi diversi. Il gel funge da setaccio per filtrare le diverse dimensioni delle molecole. Le cariche elettrostatiche che si formano nel gel agiscono come forza.
La separazione dipende dalla mobilità degli ioni.
F = fv = ZeE
V = ZeE / f
F = forza che agisce su una particella
f = coefficiente di attrito
V = velocità media di migrazione
Z = carica della particella migrante
e = carica elementare
E = intensità del campo elettrico
Le condizioni necessarie per l'elettroforesi sono relativamente semplici. Quando si prepara il gel e si analizza il campione, viene utilizzato un tampone. Marcatori e coloranti vengono utilizzati per la visualizzazione.
Cos'è l'elettroosmosi?
Questo è il processo di spostamento di un liquido attraverso un materiale utilizzando un campo elettrico applicato. Il movimento può avvenire attraverso un materiale poroso, lungo un capillare, una membrana, ecc. Può essere utilizzata come tecnica di separazione (in particolare l'elettroosmosi capillare). La velocità del liquido è linearmente proporzionale al campo elettrico applicato. Dipende anche dal materiale utilizzato per costruire il canale e dalla soluzione utilizzata. Nell'interfaccia, soluzione e materiale hanno ottenuto cariche opposte e questo è noto come doppio strato elettrico. Quando un campo elettrico viene applicato alla soluzione, il doppio strato elettrico si sposta dalla forza di Coulomb risultante. Questo è noto come flusso elettro-osmotico.
Qual è la differenza tra elettroforesi ed elettroosmosi?
• Nell'elettroforesi, le particelle solide (macromolecole come acidi nucleici o proteine) vengono spostate utilizzando un campo elettrico. Ma nell'elettroosmosi un liquido si muove.
• Nell'elettroforesi, il materiale solido di supporto è un gel. Ma per elettroosmosi può essere un gel, una membrana, un capillare, ecc.
