Differenza Tra Immunocitochimica E Immunoistochimica

2024 Autore: Mildred Bawerman | [email protected]. Ultima modifica: 2023-12-16 08:39

Differenza chiave - Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry

Immunocytochemistry (ICC) e Immunohistochemistry (IHC) sono due tecniche ampiamente utilizzate nella diagnostica molecolare, che identifica e conferma l'insorgenza sia di malattie non trasmissibili che di malattie trasmissibili in base ai marcatori molecolari presenti sulle cellule. La differenza fondamentale tra immunocitochimica e immunoistochimica è la molecola utilizzata come procedura di analisi in queste tecniche. In ICC vengono utilizzati anticorpi primari e secondari coniugati con marcatori come la fluorescenza mentre per le determinazioni diagnostiche vengono utilizzati anticorpi IHC, monoclonali e policlonali.

CONTENUTI

1. Panoramica e differenza chiave

2. Che cos'è l'immunocitochimica

3. Che cos'è l'immunoistochimica

4. Somiglianze tra immunocitochimica e immunoistochimica

5. Confronto fianco a fianco - Immunocitochimica vs Immunoistochimica in forma tabulare

6. Riepilogo

Cos'è l'immunocitochimica (ICC)?

ICC utilizza anticorpi primari e secondari legati a marcatori come marcatori fluorescenti o enzimi ed è un potente metodo di rilevamento per rilevare gli antigeni presenti sulle cellule bersaglio che possono essere particelle cellulari infettive o cellule tumorali cancerose. Tre tipi di controlli sono richiesti per l'immunocitochimica.

• Anticorpo primario: controllo che mostra la specificità dell'anticorpo primario che si lega all'antigene
• Anticorpo secondario: controllo che mostra che l'etichetta è specifica per l'anticorpo primario
• Controlli dell'etichetta: mostra che l'etichettatura è il risultato dell'etichetta aggiunta e non il risultato dell'etichettatura endogena.

Figura 01: l'immunocitochimica etichetta le singole proteine all'interno delle cellule (qui, la tirosina idrossilasi negli assoni dei neuroni simpatici del sistema nervoso è mostrata in verde).

Il controllo dell'anticorpo primario è specifico per ogni nuovo anticorpo e non può essere ripetuto per ogni esperimento. Il controllo dell'anticorpo secondario è progettato sulla base dell'anticorpo primario utilizzato nell'esperimento ed è incluso in ogni esperimento. Il controllo dell'etichettatura viene incluso se una condizione della procedura viene modificata, il campione viene modificato o quando viene rilevata un'etichettatura imprevista.

Le due principali applicazioni dell'ICC sono Radio Immuno-Assay (RIA) e Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). L'anticorpo più comunemente utilizzato è l'immunoglobulina G.

Cos'è l'immunoistochimica (IHC)?

In immunoistochimica, il campione di origine contiene anticorpi monoclonali e policlonali per determinare la presenza di antigeni in cellule estranee. Questa tecnica si basa sulla reazione specifica del legame antigene-anticorpo. Gli anticorpi utilizzati nel rilevamento possono essere contrassegnati con diversi marcatori; possono essere marcatori di fluorescenza, marcatori radiomarcati o marcatori chimici. Facilitando il legame in vitro tra l'antigene e l'anticorpo mirato, è possibile determinare la presenza o l'assenza di una particolare proteina di una cellula.

Figura 02: colorazione immunoistochimica del rene normale con CD10

Attualmente, gli scienziati sono coinvolti nello sviluppo di anticorpi bersaglio per antigeni specifici presenti nelle cellule che possono svilupparsi come cellule tumorali maligne o come antigeni presenti in agenti infettivi come l'HIV.

Quali sono le somiglianze tra immunocitochimica e immunoistochimica?

• Le reazioni sono altamente specifiche e accurate in ICC e IHC.
• Le applicazioni di ICC e IHC includono la diagnostica del cancro e delle malattie infettive.
• Le condizioni sterili devono essere mantenute in entrambe le condizioni e devono essere eseguite in vitro
• Entrambe le tecniche forniscono risultati riproducibili.
• Entrambi sono rapidi.
• Etichettatura radio e tecniche di fluorescenza sono utilizzate come metodi di rilevamento sia in ICC che in IHC.
• Entrambi sono basati sull'associazione antigene-anticorpo.

Qual è la differenza tra immunocitochimica e immunoistochimica?

Articolo diff. Al centro prima della tabella

Immunocitochimica (ICC) vs Immunoistochimica (IHC)
ICC utilizza marcatori legati agli anticorpi primari e secondari come marcatori fluorescenti o enzimi ed è un potente metodo di rilevamento per rilevare gli antigeni presenti sulle cellule bersaglio.	L'IHC è un metodo che utilizza anticorpi monoclonali e policlonali per determinare la presenza di antigeni che sono speciali marcatori proteici posti sulle superfici cellulari.
Fonte campione
I campioni derivati da tessuti che sono stati processati istologicamente in sezioni sottili vengono utilizzati in ICC.	IHC utilizza campioni costituiti da cellule coltivate in un monostrato o cellule in sospensione che vengono depositate su un vetrino.
Elaborazione del campione
In ICC, le cellule dovrebbero essere permeabili per facilitare la penetrazione degli anticorpi verso i bersagli intracellulari.	In IHC, le cellule vengono fissate in formalina e incluse in paraffina prima della colorazione.

Riepilogo - Immunocitochimica vs Immunoistochimica

La diagnostica molecolare viene utilizzata per identificare e confermare l'insorgenza sia di malattie non trasmissibili che di malattie trasmissibili sulla base dei marcatori molecolari presenti sulle cellule. I marcatori molecolari possono essere proteine o sequenze di DNA o RNA; lo sviluppo di tecnologie come ICC e IHC ha spianato la strada agli scienziati per identificare la malattia e la sua causa in una fase iniziale. Sia ICC che IHC dipendono dalle reazioni specifiche tra anticorpo e antigene, sebbene la fonte del campione. La principale differenza tra immunocitochimica e immunoistochimica è l'elaborazione del campione delle due procedure.

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