Differenza chiave - Phusion vs Taq Polymerase
Le DNA polimerasi sono enzimi ampiamente utilizzati nelle tecniche di biologia molecolare e sono anche naturalmente presenti in tutti gli organismi che subiscono la replicazione del DNA. Sono gli enzimi polimerizzanti chiave che coinvolgono durante la replicazione. La DNA polimerasi è in grado di aggiungere nucleotidi all'estremità 3 'libera del filamento di DNA, provocando così l'estensione di un nuovo filamento. Attualmente, a causa degli sviluppi della biologia molecolare nella diagnostica delle malattie e nelle applicazioni industriali, è importante produrre polimerasi aventi varie proprietà benefiche. Ciò aumenta la precisione del metodo e lo rende una tecnica più rapida. Phusion e Taq polimerasi sono due enzimi polimerasi termostabili prodotti in commercio che vengono utilizzati in speciali applicazioni molecolari. Phusion è una DNA polimerasi isolata da Pyrococcus furiosus e viene utilizzata principalmente negli esperimenti di clonazione per aumentare la fedeltà. La Taq DNA Polymerase è la DNA polimerasi standard utilizzata nella reazione a catena della polimerasi (PCR) ed è isolata dal batterio termostabile; Thermus aquaticus. La differenza fondamentale tra i due enzimi è il microrganismo di origine. Phusion è isolata dall'estremofilo, Pyrococcus furiosus, mentre la Taq polimerasi è isolata dal termofilo, Thermus aquaticus. La taq polimerasi è isolata dal termofilo Thermus aquaticus. La taq polimerasi è isolata dal termofilo Thermus aquaticus.
CONTENUTI
1. Panoramica e differenza chiave
2. Che cos'è Phusion
3. Che cos'è Taq Polymerase
4. Somiglianze tra Phusion e Taq Polymerase
5. Confronto fianco a fianco - Phusion vs Taq Polymerase in forma tabulare
6. Riepilogo
Cos'è Phusion?
Phusion DNA polimerasi è una nuova polimerasi prodotta isolando l'enzima da Pyrococcus furiosus, che è un archaea estremofilo. Questi microbi risiedono in condizioni di temperatura estremamente elevata, rendendo così la polimerasi una polimerasi altamente stabile al calore. La phusion polimerasi viene utilizzata per ottenere un'estrema fedeltà rispetto alla convenzionale polimerasi termostabile; Taq polimerasi. Phusion polimerasi è in grado di amplificare modelli lunghi fino a 7,5kb di DNA genomico. La capacità di polimerizzazione ottimale della Phusion polimerasi è a 72 0 C. Phusion è anche utilizzato nei prodotti di clonazione per il sequenziamento, l'analisi dell'espressione e l'analisi delle mutazioni.
Phusion DNA polimerasi ha l'attività di esonucleasi 3 '- 5'. Ciò consente la correzione di bozze del filamento appena sintetizzato dopo la sintesi. Quindi, le discrepanze dei nucleotidi possono essere facilmente riparate. Pertanto, ha un tasso di errore inferiore. I vantaggi complessivi della Phusion polimerasi sono;
- Fedeltà estrema
- Alta velocità e tempo di estensione ridotto
- Reazioni robuste e richiede un'ottimizzazione minima
- Ad alto rendimento
Figura 01: Phusion
Il principale svantaggio della Phusion polimerasi è che è inibito in presenza di deossiuridina trifosfato (dUTP). Quando i dUTP si accumulano nella miscela di reazione, possono inibire le azioni della Phusion polimerasi. Ciò viene evitato trattando la miscela di reazione con dUTPasi prima di aggiungere l'enzima. Attualmente, una variante resistente alla dUTP della Phusion polimerasi nota come Pfu Turbo viene utilizzata al posto della Phusion polimerasi come rimedio a questo problema.
Cos'è la Taq Polymerase?
L'invenzione della Taq DNA polimerasi ha rivoluzionato il campo della biologia molecolare. Ha risolto un grave problema nell'amplificazione del DNA. La Taq DNA polimerasi è un enzima polimerasi stabile al calore estratto e isolato dal batterio termofilo Thermus aquaticus. La scoperta di questi enzimi porta allo sviluppo della PCR. Questo enzima ha consentito l'uso della reazione a catena della polimerasi nell'amplificazione del DNA al posto delle laboriose tecniche di clonazione convenzionali. La PCR è ora utilizzata nella diagnostica molecolare, nei settori agricolo e industriale con molte nuove varianti aggiunte alla tecnica.
Figura 02: Taq polimerasi
La Taq DNA polimerasi funziona nell'intervallo di temperatura ottimale tra 72 0 C e 80 0 C. La Taq DNA polimerasi richiede un cofattore; magnesio per la sua funzione. La Taq polimerasi non ha la capacità di correzione di 3 '- 5', quindi, il tasso di errore della Taq DNA polimerasi è elevato rispetto ai tipi più recenti di DNA polimerasi come Phusion polimerasi ecc. Ma la popolarità della Taq DNA polimerasi rimane la lo stesso in tutto il mondo della scienza grazie alla comodità e alla flessibilità dell'enzima.
Quali sono le somiglianze tra Phusion e Taq polimerasi?
- Entrambi gli enzimi Phusion e Taq polimerasi sono enzimi polimerizzanti in grado di aggiungere nucleotidi all'estremità libera 3 'del filamento di DNA.
- Sia Phusion che Taq polimerasi richiedono una sequenza di primer per avviare la polimerizzazione.
- Sia Phusion che Taq polimerasi sono stabili al calore.
- Sia Phusion che Taq polimerasi sono utilizzate nei meccanismi di PCR per amplificare il DNA.
- Quando si aggiunge la polimerasi alla miscela di reazione, sia Phusion che Taq polimerasi vengono aggiunte per ultime per garantire l'efficienza dell'enzima.
- Sia Phusion che Taq polimerasi sono sintetizzate commercialmente per scopi sperimentali di biologia molecolare.
- Sia Phusion che Taq polimerasi richiedono un cofattore per completare la sua funzione.
Qual è la differenza tra Phusion e Taq Polymerase?
Articolo diff. Al centro prima della tabella
Phusion vs Taq Polymerase |
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| Phusion è una DNA polimerasi isolata da Pyrococcus furiosus e viene utilizzata principalmente negli esperimenti di clonazione per aumentare la fedeltà. | La Taq DNA Polymerase è la DNA polimerasi standard utilizzata nella reazione a catena della polimerasi (PCR) ed è isolata dal batterio termostabile Thermus aquaticus. |
| Organismo di origine | |
| Phusion viene estratto da archaea estremofili - Pyrococcus furiosus. | Queste opere letterarie vanno dal periodo di colonizzazione al periodo di decolonizzazione. |
| Capacità di correzione di bozze | |
| La capacità di lettura di 3 '- 5' è presente in Phusion. | La capacità di lettura di 3 '- 5' è assente nella Taq polimerasi. |
| Fedeltà | |
| L'alta fedeltà è presente con Phusion. | La Taq polimerasi mostra una bassa fedeltà. |
| Amplificazione | |
| Phusion è in grado di amplificare lunghi frammenti di DNA. | La Taq polimerasi è in grado di amplificare frammenti di DNA molto più corti. |
| Avvelenamento da dUTP | |
| L'azione di fusione è inibita dall'accumulo dispari. | La taq polimerasi non è inibita da dUPT. |
Riepilogo: Phusion vs Taq polimerasi
Phusion e Taq DNA polimerasi sono due polimerasi termostabili utilizzate nelle tecniche PCR. Phusion è una polimerasi isolata dall'estremofilo, Pyrococcus furiosus mentre, Taq è isolata dal batterio termostabile Thermus aquaticus. La scoperta della Taq DNA polimerasi porta all'invenzione della PCR. Phusion ha molti vantaggi rispetto a Taq che ha reso Phusion un'opzione migliore nella produzione di DNA ad alta fedeltà. Tuttavia, la Taq polimerasi è ancora utilizzata come enzima polimerasi standard nella PCR. Questa è la differenza tra Phusion e Taq polimerasi.
