Differenza Tra Transfezione Transitoria E Stabile

2024 Autore: Mildred Bawerman | [email protected]. Ultima modifica: 2023-12-16 08:39

Differenza chiave - Transfezione transitoria vs stabile

La trasfezione è un processo coinvolto nel trasferimento genico delle cellule eucariotiche mediante metodi chimici o fisici. La trasfezione può essere classificata in due tipi principali denominati trasfezione transitoria e trasfezione stabile. Durante la trasfezione transitoria, il gene di interesse non riesce a integrarsi con il genoma dell'ospite e viene espresso temporalmente all'interno dell'ospite per un breve periodo mentre, nella trasfezione stabile, il gene di interesse si integra con il genoma dell'ospite ed è sostenuto a lungo termine in diverse generazioni. Questa è la differenza chiave tra transfezione transitoria e stabile. In entrambi i casi, la trasfezione ha successo e i geni vengono espressi.

INDICE

1. Panoramica e differenza chiave

2. Cos'è la trasfezione transitoria

3. Cos'è la trasfezione stabile

4. Confronto affiancato - Trasfezione transitoria vs trasfezione stabile

5. Riepilogo

Cos'è la trasfezione transitoria?

La trasfezione è uno strumento importante per inserire i geni nelle cellule eucariotiche. Tra i due tipi di trasfezione, la trasfezione transitoria è un modo comune nel trasferimento genico. Attraverso un vettore, geni estranei vengono trasformati all'interno delle cellule ospiti. Una volta che il DNA estraneo entra nella cellula ospite, ha due opzioni. Può integrarsi con il genoma dell'ospite e replicarsi o rimanere all'interno senza integrarsi nel genoma. La trasfezione transitoria mostra l'espressione temporanea dei geni inseriti senza integrarsi nel genoma dell'ospite. I geni esprimono e producono la proteina codificata fino a quando la cellula si divide. Tuttavia, a causa dell'incapacità di integrazione, non può replicarsi ed entrare nelle generazioni future. Questo tipo di trasfezione ha successo per un breve periodo di tempo. Durante la divisione cellulare oa causa di altri fattori, il DNA estraneo è soggetto a degradazione. La trasfezione transitoria viene mostrata quando il DNA estraneo è sotto forma di DNA altamente avvolto.

Figura 01: trasfezione transitoria

Cos'è la trasfezione stabile?

La trasfezione stabile mostra un'integrazione genica estranea riuscita nel genoma dell'ospite. Una volta che il DNA estraneo entra nella cellula ospite, parte del DNA estraneo si integra con il genoma dell'ospite e ne diventa parte. Quindi, anche il DNA estraneo si replica e passa alle generazioni future quando il genoma dell'ospite si replica. Questo tipo di trasfezione è complesso e raro. Tuttavia, a causa della trasfezione stabile nel genoma, questo tratto viene mantenuto per un periodo più lungo di diverse generazioni.

La trasfezione stabile è un processo difficile e richiede un'efficace consegna del DNA e l'acquisizione cellulare del DNA estraneo nel suo genoma. Quindi, il DNA lineare favorisce la trasfezione stabile rispetto al DNA circolare. Tuttavia, il tasso di trasfezione stabile è circa uno su 10 ⁴ cellule trasformate. La trasfezione stabile può essere osservata mediante la cotrasfomazione di un marker selezionabile ed eseguendo la selezione artificiale su un mezzo.

Figura 02: trasfezione stabile

Qual è la differenza tra transfezione transitoria e stabile?

Articolo diff. Al centro prima della tabella

Transfezione transitoria vs stabile
Il DNA estraneo non si integra in un genoma ospite.	Il DNA estraneo si integra con il genoma dell'ospite e ne diventa parte.
Replica all'interno dell'host
I geni transitoriamente trasfettati non si replicano all'interno dell'ospite. Pertanto i geni non vengono trasmessi alle generazioni successive.	I geni vengono replicati all'interno dell'ospite e trasmessi alle generazioni future.
Durata dell'espressione genica
I geni vengono espressi per un periodo di tempo finito e successivamente vengono distrutti.	I geni diventano parte del genoma e si esprimono all'interno della generazione per un lungo periodo di tempo.
Uso
Ciò è utile per studiare gli effetti dell'espressione a breve termine di geni o prodotti genici.	Questo è utile per studiare gli effetti delle espressioni geniche a lungo termine.
Rilevazione della trasfezione
I geni sono espressi e possono essere facilmente rilevati inserendo un gene reporter.	La trasfezione stabile può essere facilmente rilevata inserendo un marker selezionabile e selezionando tramite selezione artificiale sui media.
Evento e processo
La trasfezione transitoria è comune e non complessa da eseguire.	La trasfezione stabile è rara e complessa da eseguire.
Natura del DNA
Il DNA altamente superavvolto è adatto per la trasfezione transitoria.	Il DNA lineare è adatto per la trasfezione stabile.
Applicazioni
Viene utilizzato per studi di knockdown genico o silenziamento con RNA inibitori, produzione di proteine su piccola scala	Viene utilizzato per la produzione di proteine su larga scala, studi di farmacologia a lungo termine, terapia genica, ricerca sui meccanismi di regolazione genetica a lungo termine

Riepilogo - Transfezione transitoria vs stabile

Le trasfezioni transitorie e stabili sono due tipi di trasfezioni mostrate durante il trasferimento del gene nelle cellule eucariotiche da parte di sistemi non virali. Il DNA estraneo trasformato non è integrato con il genoma dell'ospite nella trasfezione transitoria mentre si integra con il genoma dell'ospite nella trasfezione stabile. Il DNA circolare a spirale viene mostrato transfezione transitoria mentre il DNA lineare preferisce la trasfezione stabile. Questa è la differenza tra transfezione transitoria e stabile. Tuttavia la trasfezione transitoria è più comune e facile rispetto alla trasfezione stabile. Ma la selezione di uno tra due dipende dallo scopo del trasferimento genico e dalla durata del progetto di ricerca.